目的:通過兩種不同方法觀察卡式血型檢測方法在臨床ABO、RhD血型定型中的應(yīng)用效果。方法 采用血凝法與卡式法兩種ABO、RhD血型定型卡式檢測方法同時平行進行進行比較。
結(jié)果:(1)ABO血型定型350例中兩種方法檢測結(jié)果完全相同,但其中3例血凝法凝集效價(++);(2)RhD血型定型350例中兩種方法結(jié)果一致。結(jié)論 ABO、RhD血型定型卡式檢測方法與血凝法比較具有安全可靠,操作簡單,試驗結(jié)果準確,易判斷等優(yōu)點優(yōu)于經(jīng)典的血凝法。
【關(guān)鍵詞】
卡式血型檢測方法 微柱凝膠
隨著A B O、R h D血型定型檢測技術(shù)的快速發(fā)展,以及對醫(yī)療技術(shù)的要求不斷提高,新的血型檢測方法-卡式檢測方法在國內(nèi)大中型醫(yī)院中迅速應(yīng)用。卡式檢測方法又稱為微柱凝膠免疫檢測技術(shù),在微柱凝膠介質(zhì)中,紅細胞與相應(yīng)的抗體結(jié)合,經(jīng)過低速離心,凝集的紅細胞懸浮于凝膠中,而未與相應(yīng)抗體結(jié)合的紅細胞沉在管底。
1、材料和方法
1.1、材料
a、 微柱凝膠RhD、ABO血型卡,生理鹽水,LXJ-專用離心機,F(xiàn)YQ孵育器。
b、振蕩儀
c、 ABO血凝法血型正定型檢定卡
1.2、實驗前準備 將所有的樣品和試劑平衡至室溫。
1.2.1凝膠卡處理 實驗前,觀察微柱凝膠卡中是否有汽泡及微柱內(nèi)壁上是否粘有凝膠,如有則將其離心。
1.2.2、紅細胞懸液配制 取已離心的抗凝血紅細胞10u l加生理鹽水溶液1ml制成1% 的紅細胞懸液。
1.3、凝膠卡操作步驟 (1)撕開微柱凝膠配血卡上端的錫紙膜,露出所需檢測的孔數(shù);(2)在A、B、RhD孔中分別加入紅細胞懸液50ul; (3)將卡放到L X J-1專用離心機中離心5分鐘;(6)離心結(jié)束后在淺色背景下觀察結(jié)果。
1.4、A B O血凝法血型正定型檢定操作步驟 (1)在血型卡上,標明A孔、B孔、D孔,分別加入待檢1% 的紅細胞懸液各一滴;(2)在A孔、B孔、D孔中分別加入抗A、抗B、抗D血清各一滴;(3)將卡放到振蕩儀中振蕩混勻1分鐘,采用目視法觀察結(jié)果。
2、卡式法結(jié)果判定
(1) 陰性結(jié)果:紅細胞完全沉于凝膠管底部,表明受血者與獻血者配血相合。
(2) 陽性結(jié)果:紅細胞凝集塊位于凝膠表面或凝膠中,表明受血者與獻血者配血不相合。
3、結(jié)果
(1)A B O血型定型350例中兩種方法檢測結(jié)果完全相同,但其中3例血凝法凝集效價(++);卡式法凝集效價(+++);
(2)RhD血型定型350例中兩種方法結(jié)果一致。AB O、R hD血型定型卡式檢測方法與血凝法比較具有安全可靠,操作簡單,試驗結(jié)果準確,易判斷等優(yōu)點。
4、討論
A B O、R h D血型定型傳統(tǒng)的方法是血凝法,特點是操作便,設(shè)備簡單,缺點是影響因素多,靈敏度低;目前微柱凝膠免疫檢測技術(shù),在許多發(fā)達國家已經(jīng)作為常規(guī)技術(shù)應(yīng)用于臨床,在AB O血型鑒定、R H血型鑒定、不規(guī)則抗體檢測、鑒定和交叉配血以及新生兒溶血等檢測項目中廣泛應(yīng)用,我院于2010年采用了此種血型檢測方法,在實際應(yīng)用中取得了較好效果。
卡式血型檢測方法的優(yōu)點:
(1) 實驗全過程標準化 標準化的孵育時間、離心時間以及結(jié)果判讀,消除了主觀因素對弱反應(yīng)結(jié)果的判讀,減少了人為錯誤的發(fā)生;
(2)標本用量少 在卡式血型檢測中,標本用量相對較少,僅需1%紅懸液50ul加入微柱凝膠管,理論最少紅細胞用量僅需0.5u l。
(3)靈敏度和準確性高,重復(fù)性好,凝膠管中的凝膠中含有細小微孔,在定時定轉(zhuǎn)速條件下僅允許分散紅細胞通過,如紅細胞與所加血清發(fā)生特異性凝集反應(yīng),形成紅細胞免疫復(fù)合物,則因其體積過大而不能順利通過凝膠孔而不能沉集于凝膠底部。
(4)結(jié)果易判斷及易標準化 ,卡式血型檢測結(jié)果判斷標準明確,凝集的紅細胞,被阻擋在小柱中凝膠的上部或中央,證明發(fā)生凝集反應(yīng);游離的紅細胞,被擠過裝有過濾介質(zhì)的小柱,而到達小柱的底部,證明未發(fā)生凝集。
(5)實驗結(jié)果客觀性強,而且穩(wěn)定,可以長期保存,并可拍照存檔便于復(fù)查。
卡式血型檢測法與血凝檢測方法比較,在實驗的標準化、重復(fù)性方面具有更大優(yōu)勢,更適合常規(guī)的紅細胞血型血清學(xué)檢測,隨著醫(yī)學(xué)的不斷發(fā)展及對醫(yī)療安全的不斷重視,相信
卡式血型檢測法一定會廣泛的應(yīng)用于臨床。