你是否曾因科學(xué)課題研究的需要而想要培養(yǎng)細(xì)菌?你是否曾覺(jué)得培養(yǎng)細(xì)菌非常有趣而萌生過(guò)動(dòng)手培養(yǎng)細(xì)菌的念頭?也許你會(huì)覺(jué)得培養(yǎng)細(xì)菌很難實(shí)現(xiàn),但其實(shí)培養(yǎng)細(xì)菌是件非常簡(jiǎn)單的事情,你只需要準(zhǔn)備一些營(yíng)養(yǎng)瓊脂(一種獨(dú)特的、為細(xì)菌生長(zhǎng)供給養(yǎng)料的物質(zhì))、一些無(wú)菌培養(yǎng)皿和細(xì)菌即可。接下來(lái)跟廣州邁志一起學(xué)習(xí)如何在
培養(yǎng)皿中養(yǎng)細(xì)菌吧!
一準(zhǔn)備瓊脂。
瓊脂是用于培養(yǎng)細(xì)菌的果凍狀物質(zhì)。它是從紅藻中提取來(lái)的、可為多種細(xì)菌提供豐富營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)并保證細(xì)菌大量繁殖的養(yǎng)料。有些種類的瓊脂中添加了其他促進(jìn)細(xì)菌繁殖的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)(例如羊血)。
實(shí)驗(yàn)中最常用到的瓊脂是瓊脂粉,你只需在每個(gè)用來(lái)培養(yǎng)細(xì)菌的4英寸培養(yǎng)皿中加入1.2克(大約半茶勺)瓊脂粉即可。
在耐熱碗或隔熱杯中,加入半茶匙的瓊脂粉和60毫升(約1/4杯)的熱水,將其攪拌均勻。如果你打算培養(yǎng)多盤細(xì)菌,你可以用一定倍數(shù)的熱水按比例溶解瓊脂粉來(lái)作為細(xì)菌的培養(yǎng)基。
將碗放到微波爐中,加熱沸騰大約1分鐘,取出,待其冷卻至不在沸騰的狀態(tài)。
當(dāng)溶液準(zhǔn)備妥當(dāng)后,瓊脂粉應(yīng)當(dāng)完全溶解,溶液整體呈清亮不渾濁的狀態(tài)。
待瓊脂粉溶液冷卻幾分鐘后再進(jìn)行后續(xù)步驟。
二、準(zhǔn)備培養(yǎng)皿。
培養(yǎng)皿是用透明玻璃或塑料制成的、用來(lái)培養(yǎng)細(xì)菌或細(xì)胞等的平底容器。培養(yǎng)皿由皿蓋和皿底組成,其中皿底可插入到皿蓋中。培養(yǎng)皿不僅可以防止外部污濁的空氣污染培養(yǎng)物,還能將細(xì)菌產(chǎn)生的廢氣排出去,從而保證細(xì)菌的繁殖擴(kuò)增。
培養(yǎng)皿在使用前必須被完全消毒并保持無(wú)菌的狀態(tài),否則會(huì)影響實(shí)驗(yàn)的進(jìn)行和結(jié)果。新買的培養(yǎng)皿一般是經(jīng)過(guò)預(yù)處理的,都是無(wú)菌且被塑料密封包裝的。
打開(kāi)培養(yǎng)皿的塑料包裝,取出培養(yǎng)皿。打開(kāi)皿蓋,小心地將較熱的瓊脂溶液倒入培養(yǎng)皿中。倒入溶液的量只需覆蓋皿底,能形成一層培養(yǎng)基即可。
迅速蓋上皿蓋,以防空氣中的細(xì)菌污染培養(yǎng)基。將培養(yǎng)基冷卻30分鐘到2小時(shí),直到瓊脂溶液冷卻并硬化成果凍狀。
將培養(yǎng)基冷藏保存。如果你不打算立刻用該培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)菌,那么將其冷藏保存,待到實(shí)驗(yàn)需要時(shí)再取出培養(yǎng)細(xì)菌。
將培養(yǎng)基放在冷藏冰箱中保存可以防止培養(yǎng)基中水分的蒸發(fā)(細(xì)菌需要潮濕的生長(zhǎng)環(huán)境)。而且還能減緩瓊脂培養(yǎng)基表面變硬的速度,以防在接種細(xì)菌時(shí)菌體遭到物理撕扯破裂。
將培養(yǎng)皿儲(chǔ)存在冰箱里時(shí),培養(yǎng)皿需要倒置。這樣可以防止冷凝在皿蓋上的水掉下來(lái)破壞細(xì)菌生長(zhǎng)平面。
瓊脂培養(yǎng)基可冷藏?cái)?shù)月。在你使用培養(yǎng)基之前,先將其從冷庫(kù)中取出,待其溫度到達(dá)室溫后再接種樣品。
培養(yǎng)細(xì)菌
將細(xì)菌接種到培養(yǎng)基中。一旦瓊脂培養(yǎng)基凝固成固體或冷藏的培養(yǎng)基恢復(fù)到室溫,接下來(lái)你就可以接種細(xì)菌了。接種細(xì)菌的方式有很多,你可以通過(guò)直接接觸接種或收集樣品接種等方式來(lái)完成。
直接接觸接種:直接接觸接觸就是用含有細(xì)菌的物體直接與培養(yǎng)基接觸,將細(xì)菌傳遞到培養(yǎng)基上。最普遍的方式就是將手指(洗手前或洗手后皆可)輕放在培養(yǎng)基上。或者,你可以嘗試剪下一點(diǎn)指甲、一枚舊硬幣、一絲頭發(fā)或一滴牛奶放在培養(yǎng)基上。你可以開(kāi)動(dòng)你的想象力,放上任何合適的帶有細(xì)菌的物體。
收集樣品接種:你可以從任何表面收集細(xì)菌樣品,然后將其轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)基上。該法中,你僅需要一些棉簽。你拿住棉簽一端,并用棉簽棉花那端沾取嘴巴里、門把手上、電腦鍵盤上或者遙控器按鈕等任何你能想到的物體表面的細(xì)菌。然后將其涂在沒(méi)有干裂的培養(yǎng)基表面。以上所取樣品的地方都垢藏了大量的細(xì)菌,將其接種培養(yǎng)幾天后,你就能看到有趣惡心的結(jié)果。
如果你愿意,你可以在一盤培養(yǎng)基上接種多個(gè)樣品。在接種前,你需要在皿底上標(biāo)記分出四個(gè)部分。然后在每個(gè)部分接種一個(gè)樣品。
標(biāo)記并封閉培養(yǎng)皿。當(dāng)你接種完細(xì)菌后,你需要將皿蓋蓋上,并用膠布密封培養(yǎng)皿。
確保在每個(gè)培養(yǎng)皿的膠布上用馬克筆標(biāo)注好細(xì)菌來(lái)源等信息,否則,幾日之后你將分不清培養(yǎng)細(xì)菌的來(lái)源。
你可以將培養(yǎng)皿放入拉鏈袋中,使其得到多層保護(hù)。這樣可以防止?jié)撛谟泻旱那秩?,還不影響培養(yǎng)結(jié)果的觀察。
將培養(yǎng)皿放置在溫暖避光的地方培養(yǎng)幾天。細(xì)菌的培養(yǎng)環(huán)境最好是溫暖避光的培養(yǎng)箱。記住在細(xì)菌培養(yǎng)的過(guò)程中,培養(yǎng)皿要倒置,這樣可以防止皿蓋的水滴不會(huì)滴到培養(yǎng)基上影響細(xì)菌的培養(yǎng)。
培養(yǎng)的最佳溫度是70到98華氏度(即20-37攝氏度)。如果你將培養(yǎng)皿放在溫度較低的環(huán)境中,細(xì)菌的生長(zhǎng)速度就會(huì)減慢。
細(xì)菌的培養(yǎng)時(shí)間最好是4-6天,這樣能讓其得到充分繁殖生長(zhǎng)。一旦細(xì)菌開(kāi)始生長(zhǎng)繁殖,你也許能聞到一股獨(dú)特的氣味。
記錄你的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。幾天后,你會(huì)發(fā)現(xiàn)每盤培養(yǎng)皿中都長(zhǎng)滿了多種多樣、形態(tài)各異的微生物。
在實(shí)驗(yàn)記錄本上記錄你觀察到的培養(yǎng)皿中的微生物。也許你能根據(jù)結(jié)果總結(jié)出哪里的細(xì)菌含量最高。
細(xì)菌最多的地方是你的嘴巴嗎?是門把手嗎?還是遙控器上的按鈕?相信最終的結(jié)果能讓你大吃一驚!
如果你愿意,你可以測(cè)量菌落生長(zhǎng)的速度。你可以在皿底用馬克筆在菌落周圍畫圈。幾天后,你就能得到一組同心圓。你可以依據(jù)此觀察菌落的增長(zhǎng)。
測(cè)試抗菌藥物的有效性。本實(shí)驗(yàn)可被改變成一個(gè)有趣的實(shí)驗(yàn),就是在培養(yǎng)皿中加入抗菌劑(洗手液、肥皂等等)以測(cè)試抗菌劑的有效性。
當(dāng)你將細(xì)菌接種在培養(yǎng)基上后,用一根棉棒取一滴洗手液、消毒皂或家用漂白劑,滴在樣品中間,然后按步驟培養(yǎng)細(xì)菌。
隨著細(xì)菌的繁殖,你能看到在你滴下抗菌劑的地方形成一圈或一環(huán)沒(méi)有細(xì)菌生長(zhǎng)的區(qū)域。這就是所謂的“滅菌區(qū)”。
你可以通過(guò)對(duì)比滅菌區(qū)域的大小來(lái)比較殺菌劑的效率。被殺死的細(xì)菌越多,殺菌劑的效果越好。
細(xì)菌的安全處理
采取適當(dāng)?shù)陌踩胧T谀闾幚砼囵B(yǎng)過(guò)細(xì)菌的培養(yǎng)皿之前,你需要采取適當(dāng)?shù)陌踩胧﹣?lái)保護(hù)自己。
盡管你培養(yǎng)的細(xì)菌大多無(wú)害,但是大菌落仍有一定的危險(xiǎn)。所以在丟棄培養(yǎng)皿之前,你需要用家用漂白劑殺死細(xì)菌。
你需要帶橡膠手套、戴護(hù)目鏡以及穿著實(shí)驗(yàn)服或圍裙以防漂白劑傷害你的雙手、眼睛和衣服。
將漂白劑倒入培養(yǎng)皿中。打開(kāi)培養(yǎng)皿的皿蓋,向培養(yǎng)基上傾倒少量的漂白劑,使其殺死細(xì)菌。
小心不要將漂白劑撒到你的皮膚上,它會(huì)灼傷你的皮膚。
將無(wú)污染性的
培養(yǎng)皿設(shè)備扔到拉鏈塑料袋中,然后扔到垃圾箱中。